خالص سازی توکسین اپسیلون از سویه واکسینال کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ d با استفاده از کروماتوگرافی تبادل یون و ژل فیلتراسیون

Authors

احسان زایرزاده

احمد رضا جباری

محمد کاظم کوهی

گودرز صادقی هشجین

زینب قاسم پورآبادی

abstract

باکتری کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ d در بره­ها، گوساله­ها، کره اسب­ها، بچه خوک­ها و جوجه­ها باعث ایجاد بیماری انتروتوکسمی یا pulpy kidney می شود.  هم­چنین در انسان، عامل بیماری enteritis necroticans می باشد.  مهم­ترین توکسین تیپ d توکسین اپسیلون است.  این توکسین به عنوان مهم­ترین فاکتور ویرولانس باکتری کلستریدیوم پر فرنژنس تیپ d در بیماری­زایی به شمار می­رود.  در مطالعه­ی حاضر، عملیات خالص­سازی توکسین اپسیلون با استفاده از تکنیک­های مختلف کروماتوگرافی نظیر کروماتوگرافی تعویض کاتیون cm-sepharose و ژل فیلتراسیون sephadex-g100 با هدف ابداع روشی جدید و اقتصادی به منظور خالص­سازی توکسین اپسیلون انجام شد.  پس از کشت باکتریایی، mld نمونه­ی حاصل از کشت باعث مرگ موش­ها تا رقت 8000/1 گردید.  هم­چنین نمونه­ی کشت اولیه باعث مرگ سلول­های mdck در کشت سلولی شد.  بهترین غلظت نمک سولفات آمونیوم جهت ترسیب و تغلیظ نمونه­ی کشت باکتریایی 60 درصد تعیین شد.  پس از عملیات ترسیب، تغلیظ و دیالیز، نمونه­ی خام روی کروماتوگرافی تعویض کاتیون cm-sepharose بارگذاری شد.  توکسین اپسیلون در غلظت نمک 100 میلی­مولار خارج گردید.  توکسین اپسیلون بر اساس فعالیت توکسین در مراحل مختلف خالص­سازی حدود 9/138 برابر خالص شد.  وزن مولکولی این توکسین حدود 34 کیلو دالتون تعیین گردید.  با توجه به یافته­های این تحقیق، روش­های استفاده شده در عملیات خالص­سازی این توکسین مناسب می باشد و توکسین به دست آمده دارای میزان فعالیت و درجه­ی خلوص مناسبی است.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

خالص سازی توکسین اپسیلون از سویه واکسینال کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ D با استفاده از کروماتوگرافی تبادل یون و ژل فیلتراسیون

    باکتری کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ D در بره‌ها، گوساله‌ها، کره اسب‌ها، بچه خوک‌ها و جوجه‌ها باعث ایجاد بیماری انتروتوکسمی یا pulpy kidney می‌شود.  هم‌چنین در انسان، عامل بیماری enteritis necroticans می‌باشد.  مهم‌ترین توکسین تیپ D توکسین اپسیلون است.  این توکسین به عنوان مهم‌ترین فاکتور ویرولانس باکتری کلستریدیوم پر فرنژنس تیپ D در بیماری‌زایی به شمار می‌رود.  در مطالعه‌ی حاضر، عملیات خالص‌سازی...

full text

بررسی سمیت توکسین های آلفا (α) و اپسیلون (ε) کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ D

سابقه و هدف: کلستریدیوم پرفرنجنس یکی از مهمترین گونه های بیماری زا در جنس کلستریدیوم است. توکسین های آلفا (α) و اپسیلون(ε)  از توکسین های اصلی این باکتری به شمار می آید. این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن های کد کننده و سمیت توکسین های کلستریدیوم پرفرنجنس تایپ D در دو محیط کشت پایه و محیط کشت پایه حاوی پودر جگر انجام شد. مواد و روش ها: در ابتدا سویه استاندارد بر روی محیط کشت های پایه که نیمی از آ...

full text

بررسی سمیت توکسین های آلفا (α) و اپسیلون (ε) کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ D

سابقه و هدف: کلستریدیوم پرفرنجنس یکی از مهمترین گونه های بیماری زا در جنس کلستریدیوم است. توکسین های آلفا (α) و اپسیلون(ε)  از توکسین های اصلی این باکتری به شمار می آید. این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن های کد کننده و سمیت توکسین های کلستریدیوم پرفرنجنس تایپ D در دو محیط کشت پایه و محیط کشت پایه حاوی پودر جگر انجام شد. مواد و روش ها: در ابتدا سویه استاندارد بر روی محیط کشت های پایه که نیمی از آ...

full text

خالص سازی ایمونوگلوبولین Y از زرده تخم مرغ با روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون

سابقه و هدف: خالص سازی ایمونوگلوبولین Y از زرده تخم مرغ با روش های کروماتوگرافی از تحقیقات جدید می باشد و هدف این تحقیق نیز دستیابی به روش ساده و ارزان برای خالص سازی IgY از زرده تخم مرغ می باشد. مواد و روش ها: زرده تخم مرغ بعد از عبور از مش نایلونی در داخل استوانه مدرج جمع آوری شد. زرده با 10 برابر حجم HCL (برابر با 3mm) رقیق شده و سوسپانسیون سانتریفوژ گردید. سولفات آمونیوم تا 60% اشباع اضافه ...

full text

بررسی بیان ژن etx توکسین اپسیلون (ε) کلستریدیوم پرفرنجنس تیپ D

 مقدمه و هدف: جنس کلستریدیوم، بیش از80 گونه دارد. کلستریدیوم پرفرنجنس، یکی از بیشترین گونه های بیماریزا در جنس کلستریدیوم است که در صنعت دامداری خسارات زیادی ایجاد می کند. کلستریدیوم پرفرنجنس، توکسین های زیادی تولید می کند که توکسین اپسیلون(ε)، یکی از توکسین های اصلی آن است. در جدایه های تیپ Dی، توکسین اپسیلون عامل اصلی ایجاد کننده آنتروتوکسمی ای بسیار کشنده ًدر گوسفند و بز است. در این مطال...

full text

بررسی فیوژن ژن اپسیلون- آلفا کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D و کلستریدیوم سپتیکوم به روش In silico

تکنولوژی DNA نوترکیب یک تکنیک مولکولی in vitro جهت جداسازی و دستکاری قطعات DNA می‌باشد. با استفاده از این تکنیک ساخت مولکول‌های کایمریک به نام مولکول DNA نوترکیب، سپس واردکردن این مولکول نوترکیب به سلول‌های زنده، همانندسازی و تکثیر آنها در سلول امکان پذیر شد. امروزه تکنولوژی فیوژن پروتئین یک استراتژی برای دسترسی سریع، ارزان و پربازده بیان پروتئین هاست. توالی نوکلئوتیدی ژن اپسیلون کلستریدیوم پرف...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دامپزشکی ایران

Publisher: دانشگاه شهید چمران اهواز

ISSN

volume 11

issue 1 2015

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023